|
|
Influence of electrical pulses on human blood phagocytes
Chorvátová, Michaela ; Číž,, Milan (oponent) ; Kubala,, Lukáš (vedoucí práce)
The phagocytic cells circulating in the bloodstream play a key role in both the defense of the body and the pathology of inflammatory diseases. Thus, targeting their functions has potential to modulate an immune response, especially during the inflammatory phase. This master's thesis was focused on the influence of electric pulses on the most abundant phagocyte population in human peripheral blood, namely neutrophils. The theoretical part describes the role of neutrophils in the development of the immune response and the effects of the electric field on various cells. Consequent part of the thesis was the optimization of the electrical stimulation of neutrophils using a unique platform with a network of gold electrodes. In stimulated cells by electrical pulses, activation of selected signaling pathways, degranulation, ROS production, citrullination of histone H3 and expression of surface markers were monitored. Overall, electrical stimulation was observed to induce neutrophil activation but only electrical pulses of size 1 V were found to be statistically significant in the case of ROS production and 10 mV and 100 mV electrical pulses in the case of metalloproteinase MMP8 degranulation. The absence of significant effects in the most observed parameters was probably due to unwanted activation of neutrophils in control samples.
|
|
|
Proportional and functional characteristics of particular neutrophil subpopulations in umbilical cord and peripheral blood
Miková, Eliška ; Hrdý, Jiří (vedoucí práce) ; Krulová, Magdaléna (oponent)
Časné postnatální období se vyznačuje obecně nezralým fenotypem imunitního systému novorozence. Během tohoto období dochází k vývoji imunitního systému včetně nastavování imunitních reakcí, kde důležitou roli hraje setkávání imunitních buněk s prvotními bakteriemi kolonizujícími novorozence. V prvních dnech po narození je imunitní systém novorozence velmi omezený a adaptivní část je z velké části reprezentována protilátkami přenášenými z matky pupečníkovou krví v děloze, dále kolostrem a mateřským mlékem po porodu. Vrozená imunita, do značné míry tvořena neutrofily, proto hraje klíčovou roli v obranyschopnosti novorozenců. Cílem této studie je lepší pochopení biologie a fenotypu neutrofilů v pupečníkové krvi, ve srovnání s neutrofily z periferní krve matek a periferní krve zdravých netěhotných žen. Hodnocení fenotypu neutrofilů na základě exprese povrchových markerů bylo provedeno pomocí průtokové cytometrie. Exprese genů spojených s antimikrobiální funkcí byla měřena pomocí kvantitativní PCR. Funkční vlastnosti neutrofilů, metabolická aktivita během aktivace a fagocytózy a supresivní vlastnosti byli hodnoceny pomocí technologie SeaHorse a průtokové cytometrie. Výsledky předložené v této diplomové práci potvrzují přítomnost nezralých CD16low CD64high a CD16low CD62L+ subpopulací neutrofilů v...
|
|
|
Influence of electrical pulses on human blood phagocytes
Chorvátová, Michaela ; Číž,, Milan (oponent) ; Kubala,, Lukáš (vedoucí práce)
The phagocytic cells circulating in the bloodstream play a key role in both the defense of the body and the pathology of inflammatory diseases. Thus, targeting their functions has potential to modulate an immune response, especially during the inflammatory phase. This master's thesis was focused on the influence of electric pulses on the most abundant phagocyte population in human peripheral blood, namely neutrophils. The theoretical part describes the role of neutrophils in the development of the immune response and the effects of the electric field on various cells. Consequent part of the thesis was the optimization of the electrical stimulation of neutrophils using a unique platform with a network of gold electrodes. In stimulated cells by electrical pulses, activation of selected signaling pathways, degranulation, ROS production, citrullination of histone H3 and expression of surface markers were monitored. Overall, electrical stimulation was observed to induce neutrophil activation but only electrical pulses of size 1 V were found to be statistically significant in the case of ROS production and 10 mV and 100 mV electrical pulses in the case of metalloproteinase MMP8 degranulation. The absence of significant effects in the most observed parameters was probably due to unwanted activation of neutrophils in control samples.
|
|
|
Použití neutrofilů v nádorové imunoterapii
KOVÁŘOVÁ, Markéta
Práce je zaměřena na možné protinádorové působení neutrofilních granulocytů. Většina experimentů byla založena na in vitro sledování cytotoxického působení neutrofilů na melanomové buňky značené PAMPs. Důraz byl kladen zejména na aktivaci neutrofilů a navození jejich primovaného stavu. Kromě cytotoxických testů byla hodnocena míra degranulace pomocí detekce uvolněného enzymu - myeloperoxidázy. Taktéž jsme se pokusili o chemoatrakci neutrofilů do mikroprostředí nádoru s využitím thioglykolátového média.
|
|
| |
host ::
RSS.